中文摘要
被子植物有性生殖过程中独特的双受精现象已发现一百多年了,然而两个精细胞运动和选择受精的机理仍是未知的。本项目将以被子植物自身不会运动的精细胞经过花粉管和助细胞的转运到达卵细胞和中央细胞实现双受精这一独特的细胞运动过程为研究对象,通过显微注射的方法向生活的花粉管中同时导入耦联有不同量子点材料的微管、微丝及肌动蛋白的抗体,在荧光显微镜和高速激光共聚焦显微镜下以不同的荧光颜色同时显示这些组分,以获取双受
结题摘要
被子植物双受精的完成依赖于花粉管中的两个精细胞随着花粉管生长移动到胚囊,然后在退化助细胞中两个精细胞分别移动到中央细胞核卵细胞核附近并发生融合。在这个过程中一直有一个悬而未决的问题:同一花粉管里的两个相似的精细胞是随机的还是有偏向性地与卵细胞和中央细胞结合?解决这一问题的关键在于找到两个精细胞的差异标记,从而可以跟踪两个精细胞的移动轨迹和最终去向。在目前还没有能区分两个精细胞的分子标记的情况下,我们采用了全新的手段,将可更改荧光颜色的荧光蛋白KiKGR标记精细胞核,用380-410nm的光激发其中一个精细胞,使两个精细胞有不同颜色的荧光,从而可以将两个精细胞区分开。这是目前国际上首次能将花粉管中地两个精细胞进行区分,这一实验体系可进一步广泛用于精细胞运动及其它双受精相关问题的研究。通过项目的实施实现了对拟南芥和蓝猪耳两个精细胞的标记,在此基础上通过体外受精观察两个精细胞的运动和去向,研究结果可为被子植物的双受精过程和偏向受精提供更清晰的认识。
