昆虫抗微生物肽是体内一种具有广谱抗菌作用的小分子多肽，其表达受Toll/NF-кB信号途径的调控。本项目拟以中国家蝇为实验材料，运用同源克隆策略和RACE技术克隆家蝇体内的Toll家族成员，运用RNAi抑制Toll家族基因的表达，阻断或减弱家蝇抗微生物肽产生的信号传导，使家蝇更易感染病菌而死亡，以期为通过调控害虫免疫系统的开启来控制害虫奠定基础；运用定量RT-PCR、Northern印迹、原位杂交等方法检测Toll家族基因表达的组织特异性和Toll阻断前后抗微生物肽基因的表达谱，阐明Toll家族在家蝇抗微生物肽信号传导中的功能；采用抑制消减杂交（SSH）筛选免疫的健康家蝇虫体和RNAi抑制家蝇虫体的抗微生物肽cDNA序列，以期获得家蝇体内新的抗微生物肽基因。该项目运用了靶标特异性强的RNAi技术，避免了环境污染，为家蝇的综合防治提供了一种新的手段，并为新的抗微生物肽基因的筛选开辟新的思路。

昆虫抗菌肽是体内一种具有广谱抗菌作用的小分子多肽，其表达受Toll/NF-кB信号途径的调控。本项目运用同源克隆结合RACE技术克隆了家蝇Toll2/18w(Mdt2)cDNA全长，ORF为3354bp,编码1117个氨基酸，分子量为128.8kDa，PI为7.01。Md-toll2具有17个LRR重复区，两个跨膜区和一个TIR区。与果蝇，库蚊，埃及尹蚊toll同源性分别为68%，56%。Northern blotting和Real-time-PCR检测表明，Mdt2在家蝇卵和蛹期表达相对较高，主要在脂肪体和血细胞中表达。Northern blot 检测表明，在脂肪体内，不经任何诱导，Mdt2也存在着低量表达，在外界刺激下，表达迅速升高，相比较而言，Mdt2对S. aureas 的刺激更为敏感。RT-PCR检测 表明，注射Mdt2的dsRNA 24h后，Mdt2的转录被沉默,抗菌肽cecropin,attacin,defensin的表达相对下降，而溶菌酶表达保持不变。Mdt2沉默后的家蝇幼虫显现出对球孢白僵菌的高致敏性，表明Mdt2参与了家蝇对外界刺激的免疫识别反应。