本项目在明确二仙汤防治骨质疏松的主要活性成分的前提下，根据骨质疏松发生的病因病理学原理，采用蛋白质组学的技术方法，研究二仙汤中活性化合物及其组合对去卵巢致骨质疏松大鼠的下丘脑、垂体、甲状腺和肾上腺及成骨细胞和破骨细胞蛋白质组的影响，探讨二仙汤中活性化合物防治骨质疏松的作用靶点，观察活性物质群中的主要化合物及其组合物对靶蛋白的作用和趋势，分析各活性化合物间的相互协同、竞争、平衡、反馈作用，从蛋白质分

中医理论认为骨代谢由下丘脑-垂体-性腺分泌的多种激素所调控。本课题应用蛋白质组学技术比较去卵巢后小鼠下丘脑、垂体、子宫及骨骼蛋白质组的变化，通过差异蛋白的功能分析，发现去卵巢后，下丘脑细胞骨架破坏、神经元对相关腺体的调控功能下降，垂体的能量代谢和核酸合成下降，从而导致子宫和骨组织细胞的能量代谢失调、细胞结构破坏，骨代谢的信号转导系统出现紊乱，骨重建的平衡被破坏，骨吸收大于骨形成，导致骨丢失。根据方证相应概念，二仙汤活性化合物在整体动物和细胞水平上的蛋白质组学结果表明其方证相应的原理如下：淫羊藿苷可以使去卵巢小鼠下丘脑、垂体、子宫和骨骼的差异表达的蛋白得到一定程度的恢复，调控成骨细胞核苷酸代谢、雌激素受体调节和JUNK信号通路的相关靶蛋白，参与破骨细胞能量代谢、细胞骨架和氧化应激相关靶蛋白的调控；知母皂苷BII调节成骨细胞能量代谢和核苷酸合成相关的蛋白；小檗碱调节破骨细胞蛋白折叠、细胞凋亡和细胞周期相关的靶蛋白。化合物配伍研究发现淫羊藿苷、知母皂苷BII和阿魏酸可以协同促进成骨细胞的骨形成，淫养藿苷、小檗碱和仙茅苷协同抑制破骨细胞性骨吸收，显示出二仙汤活性化合物间相互协同和整合的特点。