中文摘要
作物的抗旱耐盐能力是多基因控制的数量性状,转录因子在调控抗旱耐盐基因表达方面具有重要作用。本项目在克隆了一个棉花干旱高盐诱导基因GhZFP1(编码一种新型CCCH锌指转录因子)的基础上,重点研究:GhZFP1在棉花中的表达特性;利用超表达和抑制表达GhZFP1转基因植株探索GhZFP1的生物学功能;利用蛋白质表达谱技术分离鉴定该锌指转录因子的下游靶蛋白及其基因;克隆靶基因的启动子序列并利用凝胶阻滞实验鉴定与GhZFP1蛋白结合的DNA序列元件。GhZFP1编码一种植物特有的CCCH锌指转录因子,通过靶蛋白或靶基因鉴定,探索由GhZFP1调控的植物抗逆新途径,并确定该新型转录因子在作物抗逆遗传改良中的应用潜力。
结题摘要
本研究构建了一个盐诱导的cNDA文库,从中我们克隆到一个上调的基因,由于其与拟南芥的CCCH锌指转录因子的同源性较高,我们将其定名为GhZFP1. Northern 杂交分析表明该基因受盐、干旱和水杨酸(SA)诱导,而且是叶片和茎表达,根中没有检测到。超表达GhZFP1的转基因烟草的耐盐性和抗真菌能力显著提高。同时我们将拟南芥和水稻的CCCH锌指转录因子进行了信息学分析,结果表明拟南芥和水稻基因组中分别存在68个和67个CCCH基因,分别分成11个和8个亚家族。基因组加倍对其基因家族的形成有重大影响。这些基因的表达存在组织特异性,其中拟南芥亚家族IX中所有的基因都含有NES核输出信号,暗示这些基因编码的蛋白有可能通过核穿梭起作用。通过Genevestigator上的芯片数据分析和RT-PCR试验表明拟南芥亚家族IX的基因响应胁迫处理。棉花的GhZFP1基因属亚家族IX。
